W losowaniu udział wzięły 64 kluby. Wśród nich znaleźć można:
- 16 klubów z PKO Ekstraklasy,
- 18 klubów z Fortuna 1 Ligi,
- 10 klubów z II ligi (bez beniaminków i drużyn z miejsc 11-18 z sezonu 2018/2019),
- 4 zwycięzców rundy wstępnej (drużyny II ligi z miejsc 11-18 z sezonu 2018/2019 po rozegraniu 1 meczu),
- 16 zdobywców Pucharu Polski w WZPN w sezonie 2018/2019.
- Gospodarzami meczów 1/32 finału Totolotek Pucharu Polski są drużyny występujące w niższej klasie rozgrywkowej. W przypadku drużyn występujących w tej samej klasie rozgrywkowej, gospodarzami są drużyny, które podczas losowania danej pary zostały wylosowane jako pierwsze - informuje Polski Związek Piłki Nożnej.
Pary 1/32 finału Totolotek Pucharu Polski 2019/20:
- Unia Skierniewice – Piast Gliwice
- Puszcza Niepołomice – Legia Warszawa
- Cracovia – Jagiellonia Białystok
- Gryf Wejherowo – Lechia Gdańsk
- Ruch Chorzów – Stomil Olsztyn
- Odra Opole – Arka Gdynia
- Pogoń Siedlce – Podbeskidzie Bielsko-Biała
- Chemik Police – Stal Stalowa Wola
- GKS 1962 Jastrzębie – Bruk-Bet Termalica Nieciecza
- Zagłębie II Lubin – Miedź Legnica
- Rekord Bielsko-Biała – Concordia Elbląg
- Legia II Warszawa – Wigry Suwałki
- Elana Toruń – Radomiak Radom
- Chełmianka Chełm – Znicz Pruszków
- Błękitni Stargard – Wisła Kraków
- Chojniczanka Chojnice – Raków Częstochowa
- Stal Rzeszów – Pogoń Szczecin
- KSZO 1929 Ostrowiec Świętokrzyski – Sandecja Nowy Sącz
- GKS Katowice – Warta Poznań
- Gryf Słupsk – Górnik Łęczna
- Widzew Łódź – Śląsk Wrocław
- Hutnik Kraków – Resovia
- Chemik Moderator Bydgoszcz – Wisła Płock
- Stal Brzeg – Olimpia Elbląg
- Stilon Gorzów Wielkopolski – Olimpia Zambrów
- Chrobry Głogów – Lech Poznań
- Zagłębie Sosnowiec – ŁKS Łódź
- GKS Bełchatów – GKS Tychy
- Garbarnia Kraków – Bytovia Bytów
- Polonia Środa Wielkopolska – Górnik Zabrze
- Korona Kielce – Zagłębie Lubin
- Olimpia Grudziądz – Stal Mielec
Finał zostanie rozegrany 2 maja 2020 roku na PGE Narodowym w Warszawie. Obrońcą trofeum jest Lechia Gdańsk.